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    上海研域与您分享ELISA试剂盒类型和步骤

    发布时间: 2018-11-23  点击次数: 173次

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       1.随着病情的进展或由其他因素影响,某些抗体在机体内的含量发生大幅波动,因此有必要对标本进行预处理,例如对血清标本作适当稀释,或离心分离血脂等。间接法测定中,标本适当稀释还可降低非特异性反应。
       2.加样一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加样:加标本、加酶结合物、加底物和加终止液。加标本时必须每份标本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶结合物、底物和终止液时则不需更换吸嘴。
       3.在成批手工检测中,还应注意操作时差的影响。加样及混匀时间的差异,使抗原抗体反应和酶促反应时间不一致,对竞争法及定量检测影响很大,不注意可能会导致错误结果或定量不准。
       4.洗涤是ELISA操作过程中决定实验成败的一个关键步骤。目的是除去未结合的免疫反应物,终止抗原抗体反应,除去标本中与反应无关的成分、游离的酶标物以及反应过程中吸附于固相载体上的非特异性物质。可用洗板机洗板或手工洗板,前者洗涤质量较好,各反应孔洗涤效果均一,批内、批间差异小,手工洗板应注意控制各孔洗涤效果,差异不宜太大。
       5.准确判定结果须使用ELISA测读仪(酶标仪),比色法判读可选择单波长或双波长,根据反应液颜色的不同选用不同波长的滤光片,以空白孔校零测定反应孔的吸光度值(A值)。酶标仪具有良好的重复性。

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