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    研域解析ELISA中的“45加样”

    发布时间: 2019-03-13  点击次数: 169次

    在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。

     

    加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法ELISA)需用稀释的血清,可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液,再在其中加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器,使加液过程迅速完成。

     

    那么在ELISA中除了包被外,一般需进行45加样。其中“45加样”是什么意思?这里的45加样,应当为45度加样,即加样枪的吸头所在的直线应当与板条所在的直线呈45度角。

     

    正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:

    (1)角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!

    (2)吸头应当贴着管壁和液面的交界处!      

     

    在ELISA中加样还要注意如下问题:

    1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!

    2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!

           

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