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    胎牛血清运用中遇到的常见问题

    发布时间: 2019-04-30  点击次数: 199次

    1、 怎样贮存和冻结血清才不会使产质量量受损?
    将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须留意的是,融解过程中必须规矩地摇晃均匀。长时间贮存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)或许集合而形成沉积或可见的混浊。因而,推荐在-20℃以下贮存血清,并防止反复冻融。
    咱们主张血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超越一个月。若一次无法用完一瓶,主张无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。

    2、血清中包括絮状沉积,它们是什么,怎样处理?
    沉积包括纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除掉沉积,离心血清(400g,1-2分钟)或许简略的让其沉积在瓶子底部,将血清当心的转移到另一个无菌瓶里(一般不主张采用过滤的方法除掉沉积,因为沉积会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况悄悄摇摆沉积并加热至37℃就会再溶解。所以,运用产品时要摇摆并加热血清至37℃,沉积会自然消失。

    3、实验室怎样选择适合的血清?
    国内一致以为HYCLONE的血清是好的,可是依据我在北美的阅历,国外一般以为GIBCO比HYCLONE好,所以并不是价格决定质量,可是总的来说这两种价格普遍偏贵,一般不是太娇气的细胞,国产的就够用了。此外,因为国内HYCLONE,GIBCO并没有生产线,咱们只能从代理商那里买,而代理商又鱼龙混杂,所以买到假货的或许性也很大。所以,我一般会从直销员那里买血清,有的国外生物公司因为刚刚进入我国,知名度不高,可是其实在国外现已做得很不错了,如Wisent等,他们在国内有办事处,我会从那里拿,血清的质量和HYCLONE平起平坐,但价格相对优惠很多。

    4、 怎样防止血清中发生沉积?
    按如下操作可防止沉积的发生:
    (1)冻结血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉积的发生。
    (2) 血清分装冻存时,须规矩摇晃均匀(当心勿形成气泡),使温度与成分均一。
    (3) 勿直接由-20℃直接至37℃冻结,因温度改变太大,简单形成蛋白质凝结而发生沉积。
    (4) 勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得污浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因而受到破坏,然后影响血清的质量。
    (5) 血清的热灭活十分简单形成沉积物的增多,若非必要,可以无须做此过程。
    (6) 若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的准则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会形成沉积物的增多。

    5、小牛血清和胎牛血清有何区别与留意事项?
    来历不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。

    组份与份额不同:两者所含的促细胞成长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与份额不同,用途与用法不同:某些细胞必需胎牛血清才能成长,而有些细胞只需小牛血清即可,运用浓度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的浓度在20%。
    血清保存和运用须留意:血清应保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不行超越一个月。冻结血清时 ,应先将血清至于2-8℃冰箱,并经常摇匀使之溶解,然后至室温放置使之升温,不行将冷冻的血清直接放入37℃水浴或许温箱中,如放在37℃冻结,色彩加深,粘稠度也会添加,血清在冻结和热灭活后,应按用量分装并于-20℃保存,防止反复冻融。

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