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    研域生物:酶标抗体的质量判定与保存

    发布时间: 2019-05-08  点击次数: 85次

    1.  酶活性和抗体效价测定

    采用双向免疫扩散法(稀释抗体)和DAB-H2O2 显色反响检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反响。
      

    2.  酶量和IgG量

    酶量(mg/ml)=OD403 ′0.4

    IgG量(mg/ml)=(OD280- OD402 ′0.42)′0.94′0.62

    其间,0.42为酶蛋白自身(0.3)及结合戊二醛后添加的OD值,0.94为抗体蛋白与醛化酶结合后,OD280 约添加6%,故乘以0.94。兔IgG的OD280 =1.0时为0.62.

    过碘酸钠符号法IgG量(mg/ml)=(OD280- OD402 ′0.3)′0.94′0.62

    符号率= OD403 / OD280 =0.3-0.6,即一个抗体分子上结合1-2个HRP分子.符号率能够大于0.6-0.9。OD403 / OD280 =0.4,约相当于E/P=1.0。
     

    酶标抗体的保存
    经判定合格的酶标抗体,因为硫化物及叠氮化物等可与酶结合,使HRP失活,因而,不能用硫化物及叠氮化物作为防腐剂,可加入等量的60%甘油,小量分装(0.5ml/支),置4℃~-30℃保存。

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