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如何选择合适的HA标签抗体？

发布时间： 2019-05-28　　点击次数： 1122次

HA标签系统利用一个HA (流感病du血凝素，influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽融合到目标蛋白。HA标签可位于蛋白质的C端或N端，该系统已广泛应用于多种细胞类型，相应的HA标签抗体也被广泛应用。HA标签抗体能特异识别C末端或N末端带有HA标签(HA-tagged)的融合蛋白，也可以用于检测和HA tag融合表达蛋白的表达、细胞内ding位，以及纯化、定性或定量检测HA tag融合表达蛋白等。

我们在选择一个标签抗体时，主要根据自己实验应用上的需要。这里需要考虑的因素包括，HA抗体的应用检测类型、HA抗体的克隆性及制备来源等。比如该HA抗体是否能用于免疫荧光IF的检测？是否可以用于Western Bloting和免疫沉淀IP实验？是否需要HRP偶联的单克隆HA标签抗体？还是一个兔来源的HA多抗更合适？

一般来说，应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性都要优于多克隆抗体，而多克隆。另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl HA抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5000，终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的HA抗体（假如WB检测的稀释比率是 1:200，终使用液相当于200ml）性价比更高。因此在选择抗体的时候，不但需要考虑抗体的量，还需要考虑抗体的效价，即不同应用的建议稀释比率。

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