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    关于细胞因子ELISA试剂盒的五种检测办法

    发布时间: 2019-09-29  点击次数: 97次

    细胞因子ELISA试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗体ELISA检测。ELISA是研究蛋白抗体的重要办法。它采用抗原与抗体的特异反响将待测物与酶进行直接或直接结合,然后通过酶与底物发生颜色反响,进行定性和定量分析。接下来我们来介绍细胞因子ELISA试剂盒的五种检测办法。
        
    一、直接法
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    使用了二抗添加信号强度,也使抗体的挑选多样化,可是直接法简单发生穿插反响。直接法只能用于测定抗体,首要用于疾病的诊断,其优点是只需要改变包被抗原,酶标抗体是通用的。
     
    二、捕获法
       
    全称捕获包被法也称为反向直接法,首要用于测定血清中某类抗体亚型如IgM。为扫除血清中IgG的搅扰,用抗IgM抗体包被后用于捕捉样本中的IgM,然后加入特异性结合抗原进行后续检测。在测定IgM的试验中常遭到类风湿因子(RF,一种能结合多种动物IgG Fc的自身IgM抗体)的搅扰,导致假阳性反响。采用F(ab')或Fab片段制备酶标抗体可以消除RF的搅扰,这一办法在双抗体夹心法中也具有同样的功效。
       
    三、竞争法
     
    是用样本中的游离抗体/抗原与固相的酶标抗体/抗原竞争性结合的分析办法。当游离抗体(或抗原)浓度越高,则能与固定抗原(或抗体)结合的酶标抗体(或抗原)就越少,后续显色就越浅,即与对照比较,显色越浅,表示检测样本中抗体(或抗原)含量越高。该法特别适合小分子物质的检测也可用于检测比较不纯的样本,且重复性好,可是检测的灵敏度和专一性较差。竞争法测抗原常用于检测小分子抗原及半抗原,这类抗原一般缺少两个以上的识别位点,不适用于双抗夹心法进行测定。
      
    四、直接法
     
    仅需要抗原和酶标一抗,操作简洁,可防止穿插反响,可是该办法要求酶标一抗有较高的特异性要求,一起也并非所有的一抗适合标记处理。直接法在实际运用中并不多见,它并不能对样本中抗体进行定量分析,因为样本中抗体是非酶标抗体,无法进行后续显色,可是该法经过改进便是竞争法。

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