研域课堂：血清搅扰性内源性与外源性物质的详解

ELISA试剂盒检测中血浆一般可视为与血清同等的标本，标本中搅扰性物质是引起检测后成果偏高或偏低的主要原因，搅扰性物质分为内源性物质和外源性物质两大类：

1、外源性物质
 
外源性物质常常是因为用于ELISA试剂盒测定的血标本的收集、储存等不当所形成的。如标本溶血、标本被细菌污染、标本储存过久、标本凝聚不全和采血管中添加物等影响。
 
1)标本溶血
 
因为各种人为原因引起的标本溶血，均可因红细胞破坏溶解时释放出很多具有过氧化物酶活性的血红蛋白，在以辣根过氧化物酶为符号的ELISA试剂盒测定中，会导致非特异性显色，搅扰测定成果。
 
2)标本受细菌污染：因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶，因此，被细菌污染的标本同溶血标本一样，亦可发生非特异性显色而搅扰测定成果。

2、内源性物质
 
常见的搅扰物质有：类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原本身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig(s)抗体、穿插反应物质和其它物质等。
 
1)类风湿因子：血清中IgM、IgG型类风湿因子（RF）在ELISA试剂盒检测中，可与ELISA试剂盒体系中的捕获抗体及酶符号二抗的FC段直接结合，然后导致检测OD值偏高。
 
2)补体：ELISA试剂盒体系中固相一抗和符号二抗过程中，抗体分子发生变构，其FC段的补体C1q分子结合位点被露出出来，使C1q能够将二者连接起来，然后形成检测OD值偏高。
  
3)嗜异性抗体:人类血清中含有能与啮齿类动物（如鼠等）Ig(s)结合的天然嗜异性抗体，可将ELISA试剂盒体系中一抗和二抗连接起来，也能形成检测OD值偏高。
  
此外血清中嗜靶抗原本身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig(s)抗体、穿插反应物质及血清中脂质过高、胆红素、血红蛋白及血液粘度过大等，均对ELISA试剂盒测定成果有搅扰效果。