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    研域干货:常见ELISA试剂盒试验技能要点

    发布时间: 2019-10-24  点击次数: 254次

    1. 准备好所有试验额定所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等;

    2. 依据检测标本数量确认所需试剂的量;

    3. 按阐明书将所用试剂平衡至室温,制造所需试剂;

    4. 标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备,尽量分装做备份。短期内无法试验者,留意低温保存。

    试验中为了确认信号和背景应将捕获抗体(0.5-4μg/ml)和检测抗体(0.25-2μg/ml)在预试验中进行彼此相抗的滴定。同时,应包括在适当范围内的规范品的系列稀释。按试剂阐明书惯例供给的范围进行操作。

    规范品的制造:对于每种细胞因子应仔细阅读阐明书,留意每批的细节。在运用细胞因子前,瞬时离心试剂瓶,尽可能多地回收其间的细胞因子。依据每批阐明书中的细节,将冻干的细胞因子复溶。

    为了优化灵敏度,主张过夜孵育规范品和标本。若运用过氧化物酶作为显色体系,应禁止在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。当测定混合液体中的抗原时,如血清,主张在标本稀释液中加不相干的Ig。

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