您好,欢迎进入研域(上海)化学试剂有限公司网站!
一键分享网站到:
  • 技术文章ARTICLE

    您当前的位置:首页 > 技术文章 > 研域解析:酶符号抗体的制备办法

    研域解析:酶符号抗体的制备办法

    发布时间: 2020-02-14  点击次数: 164次

    酶符号抗体的制备办法主要有两种,即戊二醛交联法和过碘酸盐氧化法。 
    (1)戊二醛交联法:戊二醛是一种双功用团试剂,它可以使酶与蛋白质的氨基通过它而联合。碱性磷酸一般用此法进行符号。交联办法一步法、两步法两种。在一步法中戊二醛直接参加酶与抗体的混合物中,反应后即得酶符号抗体。 
    ELISA中常用的酶一般都用此法交联。它具有操作简洁、有效(结合率达60%-70%)和重复性好等优点。缺点是交联反应是随机的,酶与抗体交联时分子间的份额不严格,结合物的巨细也不均一,酶与酶,抗体与抗体之间也有或许交联,影响效果。两步法的产品中绝大部分的酶与蛋白质是以1:1的份额结合的,较一步法的酶结合物更有助于本底的改进以提高敏感度,但其偶联的有效率较一步法低。 
    (2)过碘酸盐氧化法:本法只适用于含糖量较高的酶。辣根过氧化物酶的符号常用此法。反应时,过碘酸钠将HRP分子外表的多糖氧化为醛基很活泼,可与蛋白质上的氨基构成Schiff氏碱而结合。
    按以上办法制备的酶结合物一般都混有未结合物的酶和抗体。理论上,结合物中混有的游离酶一般不影响ELISA中zui后的酶活性测定,因通过彻底洗涤,游离酶可被除掉,并不影响显色。但游离的抗体则不同,它会与酶标抗体竞争相应的固相抗原,从而减少了断合到固相上的酶标抗体的量。

产品中心 Products
在线客服 联系方式

服务热线

021-54479081
021-54461587

扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站