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    今日解答:关于抗体纯化的方法!

    发布时间: 2020-02-21  点击次数: 185次

    我公司具有yi流的抗体技能效力团队,可为客户供给多种抗体纯化效力,如硫酸铵纯化、Protein A/G纯化、抗原亲和纯化等,协助客户处理各种抗体纯化问题。今天我们就来看看那些关于抗体纯化的方法吧!

    1.抗体纯化的办法包括DEAE离子交换色谱法、硫酸铵沉淀法及其他办法,其间蛋白G或蛋白A亲和柱法纯化较为简单、高效,抗原亲和柱法纯化则能获得针对抗原的特异性抗体。

    2.制备高特异性、高效价的抗体是实验免疫学技能的根底,抗体质量的凹凸将直接影响实验的胜败。多克隆血清中含有凌乱多样的抗体,它不只含有针对免疫原发生的抗体,还有血清的全部抗体,此外还含有许多自身的血清蛋白。为了获得成分相对单一的抗体或将抗体用于特定的用处,就需要对抗体进行纯化处理。

    3.纯化抗体的用处之一是下降非特异性本底,能去除引起实验差错的污染蛋白,且能精确控制实验中发生阳性信号的抗体量, 因而纯化抗体可以作为全部免疫化学实验中下降本底的根本手法。别的,运用纯化抗体还能进行抗体符号(减少有时运用符号二抗带来的搅扰),或用于制备免疫亲和纯化柱等。
    注:
    1. 蛋白A或蛋白G是细菌胞壁蛋白,它们能结合抗体Fc段,这一结合十分结实,但其亲和力对pH的改变活络,抗体/蛋白A或蛋白G的亲和力随PH值的下降而急剧下降,因而可用于纯化不同来历的抗体和抗体亚型。
    2. 在抗血清中免疫球蛋白IgG的含量为8-12 mg/ml,只占血清中总蛋白含量的10%左右。蛋白A/G纯化抗体的得率大约为5-10 mg总IgG/ml 抗血清。

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