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    细胞培养需注意哪些过程

    发布时间: 2022-07-26  点击次数: 147次

    细胞培养

    一、准备工作
    准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试等。


    二、取材
    在无菌环境下从机体取出某种组织细胞,经过一定的处理后接入培养器血中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的初次培养称为原代培养。理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养,实际上幼体组织比成年个体的组织容易培养,分化程度低的组织比分化高的容易培养。取材后应立即处理,尽快培养,因故不能马上培养时,可将组织块切成黄豆般大的小块,置4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌,同时也要避免接触其他的有害物质。取病理组织和皮肤及消化道上皮细胞时容易带菌,为减少污染可用抗菌素处理。

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    三、培养
    将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养,则直接将组织块接入培养器皿底部,几个小时后组织块可贴牢在底部,再加入培养基。如系细胞培养,一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数,按要求以一定的量(以每毫升细胞数表示)接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后,立即放入培养箱中,使细胞尽早进入生长状态。


    正在培养中的细胞应每隔一定时间观察一次,观察的内容包括细胞是否生长良好,形态是否正常,有无污染,培养基的PH 是否太酸或太碱(由酚红指示剂指示),此外对培养温度和CO2 浓度也要定时检查。


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    以上是细胞培养需注意哪些过程

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