浅谈EL ISA检测血清注意事项

大部分EL ISA检测均以血清为标本。血清标本可按惯例方法收集应留意防止溶血红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物贡以HRP为符号的EL ISA测定中溶血标本可能会添加啡特异性显色。 血清标本宜在新鲜时检测。如有污染菌体中可能含有内源性HRP也会发生假阳性反应。

一般说来在5天内测定的血清标本可放置于4C。 超越-周测定的需 20°C保存. 冻住血清融解后蛋白质局部浓缩散布不均应充沛混匀并防止发生气泡。混浊或有沉积的血清标本应先离心或过滤弄清后再检测。 重复东融会使抗体效价 下跌所以测抗体的血清标本如需保存作展次检测宜少量分装冰存。 保存血清自收集时就应留意无菌操作 也可参加适当防腐剂。

EL ISA试剂盒检测血清的详细留意事项:

1.要留意防止呈现严峻溶血。血红蛋白中含有血红素基团其有类似过氧化物的活性 因而在以HRP为符号酶的ELISA测定中如血清标本中血红蛋白浓度较高则其就很简单在温育过程中吸附于固相 然后与后边参加的HRP底物反应显色。

2.冰冻保存的血清标本须置意防止因停电等形成的重复冻融。标本的重复冻融所发生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子发生损坏效果然后引起假阴性结果。 此外冻融标本的混匀亦应留意 ，不要进行剧烈振荡重复倒置混匀即可。

3.标本在保存中如呈现菌体污染所造成的的混油或驾状物时应离心沉积后取上清检测。

4.样本的收集及血清别离中要留意尽量防止菌体污染则菌体的成长 其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白发生分化效果;-则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β半乳糖苷酶本身会对用相应酶作符号的测定方法发生非特异性搅扰。

5.血清标本如是以无菌操作别离则可以在2 ~8C下保存周如为有菌操作 则主张冰冻保存。 样本的长期保存应在70°C以下。

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