上海研域生物大鼠ELISA试剂盒的物理吸附作用

上海研域生物大鼠ELISA试剂盒的包被原理主要基于抗原或抗体与固相载体之间的物理吸附作用。这一过程涉及蛋白质分子的疏水基团与聚苯乙烯固相载体表面的相互作用，从而实现抗原或抗体的固定。

包被的基本原理

ELISA试剂盒中的包被步骤是将抗原或抗体固定在固相载体（如聚苯乙烯微孔板）上。这一过程依赖于蛋白质分子的疏水基团与固相载体表面的相互作用。大分子蛋白质由于含有更多的疏水基团，更容易吸附到固相载体表面，而小分子蛋白质则需要通过与大分子蛋白结合后才能固定。

包被方法的选择

直接吸附法：适用于大分子蛋白质（如IgG），通过物理吸附直接将抗原或抗体固定在固相载体上。

间接捕获法：适用于小分子蛋白质或非蛋白质抗。通过预先包被特异性抗体，再利用抗原与抗体的特异性结合，提高抗原的纯度和试验的特异性。

包被条件的优化

包被效果受多种因素影响，包括抗原或抗体的浓度、包被时间、温度、pH值以及封闭液的选择等。例如，常用的封闭液包括BSA、牛血清或脱脂奶粉，用于填充非特异性结合位点，减少背景信号。此外，包被缓冲液的选择也至关重要，常见的缓冲液包括碳酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液等。

包被质量的影响

包被质量直接影响ELISA试剂盒的灵敏度、特异性和重复性。理想的包被应确保固相表面尽可能多地吸附目标抗原或抗体，并且结合牢固，能够耐受洗涤过程。

特殊包被方式

对于脂质类物质或其他难以直接吸附的抗原，可以通过溶解后加入ELISA板孔中，待酒精挥发后让脂质自然干固在固相表面。此外，亲和素-生物素系统也可用于非蛋白质抗原的包被，通过亲和素与生物素之间的高亲和力结合，实现抗原的均匀包被。

注意事项

包被过程中需严格控制抗原或抗体的浓度和包被时间，以避免过量或不足。

洗涤步骤需以去除未结合的抗原或抗体及封闭液中的杂质。

封闭步骤可采用中性缓冲溶液，以排除干扰物质的再吸附。

上海研域生物大鼠ELISA试剂盒的包被原理主要基于蛋白质与固相载体之间的物理吸附作用，通过优化包被条件和方法，可以显著提高试剂盒的灵敏度和特异性。