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    96T小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)酶联免疫分析ELISA试剂盒

    发布时间: 2012-07-04  点击次数: 1199次

    小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)酶联免疫分析ELISA试剂盒

    本试剂盒仅供研究使用。
     

    小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)酶联免疫分析ELISA试剂盒

    检测范围:0.35pg/ml-12pg/ml

    小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)酶联免疫分析ELISA试剂盒

    使用目的:
      本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白血病抑制因子受体(LIFR)含量。
    实验原理
      本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)水平。用纯化的小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白血病抑制因子受体(LIFR),再与HRP标记的白血病抑制因子受体(LIFR)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的。颜色的深浅和样品中的白血病抑制因子受体(LIFR)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白血病抑制因子受体(LIFR)浓度。
    试剂盒组成
    1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
    2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(24pg/ml) 0.5ml×1瓶
    3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
    4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
    5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 
    6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
    标本要求
    1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
    2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
    操作步骤
    标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
    12pg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
    6pg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
    3pg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
    1.5pg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
    0.75pg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液


    加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
    温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  
    配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
    洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
    加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
    温育:操作同3。
    洗涤:操作同5。
    显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
    终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转)。
    测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
    操作程序总结:


    计算
       以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
    注意事项
    1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
    2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
    3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
    请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
    封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
    6.底物请避光保存。
    7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
    8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
    9.本试剂不同批号组分不得混用。
    10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
    保存条件及有效期
    1.试剂盒保存:;2-8℃。
    2.有效期:6个月

    N2607-5g 6-Nitrobenzimidazole 6-硝基苯并咪唑 [94-52-0] 5g 
    N2603-25g 2-Nitrobenzoic acid 2-硝基苯甲酸 [552-16-9] 25g 
    N2604-25g 3-Nitrobenzoic acid 3-硝基苯甲酸 [121-92-6] 25g 
    N2605-25g 4-Nitrobenzoic acid 4-硝基苯甲酸 [62-23-7] 25g 
    N6536-25g 3-Nitrobenzonitrile 3-硝基苯腈 [619-24-9] 25g 
    N2617-5g 4-Nitrobenzyl bromide 4-硝基溴化苄 [100-11-8] 5g 
    N5095-25g 2-Nitrobenzyl alcohol 邻硝基苄醇 [612-25-9] 25g 
    N5096-25g 4-Nitrobenzyl alcohol 对硝基苄醇 [619-73-8] 25g 
    N2616-5g 4-Nitrobenzyl chloride 4-硝基苄氯 [100-14-1] 5g 
    N6257-100g 5-Nitro-2-furaldehyde diacetate 5-硝基糠醛二乙酯 [92-55-7] 100g 
    NB0661-50g Nitrofurantoin 呋喃妥因 [67-20-9] 50g 
    NB0661-250g Nitrofurantoin 呋喃妥因 [67-20-9] 250g 
    N6258-100g 5-Nitroguaiacol 5-硝基愈创木酚 [636-93-1] 100g 
    N6039-100g 5-Nitroindazole 5-硝基吲唑 [5401-94-5] 100g 
    PB0679-5g PAN 1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚 [85-85-8] 5g 
     

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