促肾上腺皮质激素（ACTH）ELISA试剂盒准确性

促肾上腺皮质激素（ACTH）ELISA试剂盒用于测定猴血清、血浆及相关液体样本中促肾上腺皮质激素（ACTH）含量。

实验原理
促肾上腺皮质激素（ACTH）ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猴促肾上腺皮质激素（ACTH）水平。用纯化的猴促肾上腺皮质激素（ACTH）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入促肾上腺皮质激素（ACTH），再与HRP标记的促肾上腺皮质激素（ACTH）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的。颜色的深浅和样品中的促肾上腺皮质激素（ACTH）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中猴促肾上腺皮质激素（ACTH）浓度。

·准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。 
·灵敏度：zui低检测浓度小于10 pg/ml。 
·特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。 
·重复性：板内、板间变异系数均小于15%。 

促肾上腺皮质激素（ACTH）ELISA试剂盒操作步骤
1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。 
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。
5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。