快速细胞分析仪应用简介

发布时间： 2010/7/6　　点击次数： 1172次

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详细介绍：

细胞计数一直是令大家头疼的事，传统的细胞计数不但麻烦，而且还没有办法判断细胞的活率、细胞的体积、细胞的的直径、细胞的浓度、以及细胞碎片等诸多问题。

传统的细胞计数方法就是一台细胞计数器（hemacytometer）和一部显微镜，为了得到准确的计数，血细胞计数器必须首先用擦镜纸*的进行清洁，然后用将要进行计数的细胞填满血细胞计数器，过程必须十分小心，这样才能保证细胞稀释的合适浓度和细胞没有聚集的现象，接着你得用显微镜按照血细胞计数器上的小栅格进行计数，为了准确起见，你不停的计数直到你数了至少100个细胞为止。

目前使用比较常用的方法是：首先取来样品细胞用台盼蓝染色，然后通过CDC成像，细胞在CDC成像后通过软件来计算细胞的个数和细胞的活率，但是这种做法却存在一下缺点：

一是台盼蓝对细胞有毒害作用，对部分已损伤的细胞会致死，活性测量的结果会有所偏差；

二是对于细胞聚集的团块无法用染色来分辨计数。

三是检测结果重复性差

我现在给大家介绍一种新的方法：

把样品细胞悬浮在（一种等电压的电解质溶液）中，在通过一根毛细管测量通道时，被频率为1MHz的电脉冲扫描检测细胞，由于死细胞的膜是破裂不完整的，胞内的细胞质同膜外的等渗透缓冲液有相同的电导率，因此电脉冲信号能够穿过膜直接检测到细胞核的大小，而活细胞拥有完整的细胞膜，电脉冲信号无法透过，测到的是全细胞的体积，每个细胞或团块经过测量孔时都会产生一个信号，信号次数就是细胞的数目，信号的大小也与细胞的大小呈一定比例，利用两者体积上的差异，就能够区分死活细胞

功能：细胞计数、细胞死活判断、细胞体积检测、细胞团校正.

包括: 细胞碎片数细胞活率细胞团校正系数

活细胞数 / 活细胞浓度

死细胞数 / 死细胞浓度

总细胞数 / 总细胞浓度

细胞直径 / 平均直径

细胞总体积 / 平均体积/典型体积

适用范围：

包括所有的哺乳动物细胞（包括肿瘤细胞, 血细胞, 原代培养细胞及各种细胞系），藻类，细菌，精子细胞，寄生虫，浮游生物等.

应用领域：

药理毒理分析 / 肿瘤研究 / 混合细胞（干细胞）样本分析；

组织工程 / 发酵监控 / 病毒感染复数（MOI）分析 / 细胞质量控制；

细胞培养条件的优化 / 环境毒理与检测 / 海洋生物和藻类研究

细菌及颗粒的计数 / 细胞结团情况评估等

胞膜完整性区分法

这与传统的台盼蓝染色法有着很大程度的不同。传统的台盼蓝染色有三大缺点和不足：

一是台盼蓝对细胞有毒害作用，对部分已损伤的细胞会致死，活性测量的结果会有所偏差；

二是对于细胞聚集的团块无法用染色来分辨计数。

三是检测结果重复性差。

胞膜完整性技术无须使用染色，而是利用细胞膜的完整性来测定。死细胞具有一个可渗透的细胞膜，它允许等渗缓溶液CASYt-on进入。因此，死细胞内的细胞质同胞外的等渗缓冲液具有相同的电导率，可以被电极所忽略，所测得的仅仅是紧密结构的细胞核的体积。而活细胞拥有完整的细胞膜，胞膜完整性技术分析的是全细胞的体积。利用两者的相对差异即可区分开来。

电子脉冲分析技术

它和传统的CCD成像技术有很大的不同。CCD成像技术质量不高，而且是从静态获取信息，因此有偏差。而电子脉冲分析技术使用的是动态的电子脉冲分析技术从来获取信息。当悬浮于电解质溶液中的细胞通过一个的测量孔抽提时，在这片低压区域中被每秒1百万次频率的电子脉冲扫描，同时可对每个细胞作大小，重量厚度及时间的分析。这些信号将在一个有512000个通道的多孔径分析器中分离和积累，zui后*的结果由芯片计算技术即时性的完成

进步与优势：

1．电子背景信号通过电子脉冲分析域而被过滤。因此，它是在无背景条件下工作的，即使细胞含量小于100个/ml也能被准确的测量。

2．即使在高活性区间80%--100%也能进行*的辨认，而不会出现错误的阳性结果。

3．绝大多数染色法都会伤害细胞，引起结果的偏差。*的方法可免除这种结果，得到真实的细胞情况。

4．不必担心样品的浓度过高而影响测量。当高浓度超过允许的极限值时，系统会发出警告信息，通过调整测量的毛细管而改变极限值，然后通过稀释调节浓度而测量。

5．对于棘手的细胞团问题，通过一个细胞团校正器，它的无限制测量范围，能在多点测量尺度耦合，使得小细胞团和大细胞团体积都可以测得

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