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    中科院动物研究所分离出小鼠皮肤干细胞

    发布时间: 2009-08-07  点击次数: 2640次

    来自中科院动物研究所的段恩奎等人从小鼠分离和鉴定了SKPs(皮肤干细胞),这一研究成果公布在Cell Proliferation 杂志上。

         SKPs表达Nestin、Fibronectin、Stat3和Oct4等干细胞标记分子。SKPs能在体外扩增并稳定维持其干细胞特性,并能自发向神经细胞、平滑肌细胞和脂肪细胞分化。本研究在体外利用三步法诱导小鼠干细胞分化为三维胰岛样集落(IPCs)。在Stage 1中,SKPs以悬浮的细胞球传代培养在DMEM/F12培养基(含有20 ng/ml表皮生长因子、40 ng/ml 碱性成纤维细胞生长因子、1% B27,培养基葡萄糖的浓度为17.3mM)。在Stage 2中,SKPs在DMEM/F12培养基(含有1 mM二丁酰环腺苷酸、1 μM维甲酸、1% B27 和2% FBS,培养基葡萄糖浓度为5mM)中培养2天,SKPs从细胞球中迁移出来形成单层细胞。在Stage 3中,细胞在DMEM/F12培养基(含有10 mM 烟酰胺、10 nM I型胰岛素样生长因子、2nM 激活素A、1% B27和2% FBS,培养基葡萄糖浓度为17.3mM)的中培养7天,细胞能够形成二硫腙阳性(Dithizone positive, DTZ+)的三维胰岛样集落(IPCs)。RT-PCR和间接免疫荧光的结果表明,IPCs共表达胰岛素和C-肽,并表达胰腺β细胞发育和功能相关的基因和转录因子,如Insulin 1、Insulin 2、Islet-1、Pdx-1、NeuroD/beta2、Glut-2 和 Nkx6.1,但不表达胰腺中其它的激素,如胰高血糖素、生长激素抑制素和淀粉酶。体外葡萄糖刺激的功能性实验结果表明,IPCs受葡萄糖浓度刺激而分泌胰岛素。

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