ELISA试剂盒实验误差注意事项

ELISA试剂盒可以简单、地从琼脂糖凝胶上纯化回收DNA段，同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。可回收100bp–40 kb DNA段，可纯化高达10μg的DNA段，回收率可达80%以上（<100bp或>10kb的DNA段回收率为30–50%）。使用ELISA试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等各种分子生物学实验。
ELISA试剂盒注意事项：
1、 不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同，务必按照所用试剂盒严格操作，否则容易产生检测结果的不确定性.
2、 若不同批号试剂的不同组分（A液或酶工作液），或不同试剂的不同组分进行交叉使用，有可能出现显色浅或本底高，花板等情形。
3、 加样时样品量误差，对于阴或很阳的标本影响不大，但对阈值附近的标本影响极大，建议校对加样器。
4、 反应时间的误差，做大量标本时，*孔和zui后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。
5、 由于滴瓶的精密性肯定不如加样器，不排除不同滴头滴量的误差。另外滴加过程中是否产生气泡、速度是否均匀，是否颤动等影响液量的因素均可导致以上情况。高标准要求时应使用加样器。
6、 阈值附近实际上是个灰区（gray scale）,不能截然分为阴性、阳性，国外厂家均要求对这部分可疑标本进行奇数次复检，以次数多者为准，如一次阳两次阴zui后判为阴，但实际上是否为阴不好说，只有判为可疑，临床上可以让患者过一段时间后再测。
7、 肉眼观察稍显色，酶标仪打印为阴性的标本在实际工作中是难以避免的，肉眼目测结果不可靠，应以酶标仪判读为准。
8、 由阴性变为强阳性原因多为操作过程中漏加试剂等有关。
9、 临界值附近标本波动为正常现象，任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。