服务热线
021-54479081
021-54461587
-
ELISA试剂盒各首要构成试剂的挑选注意事项
发布时间： 2016-12-05 点击次数： 1203次ELISA试剂盒中，各首要构成试剂的挑选留意事项其间包含:
(1) 固相载体的挑选：很多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。现在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不论何种载体，在运用前均可进行挑选：用等量抗原包被，在同一试验条件下进行反响，调查其显色反响是不是均一性，据此判明其吸附性能是不是良好。
(2) 包被抗体的挑选：ELISA试剂盒将抗体吸附在固相载体外表时,请求纯度要好,吸附时一般请求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时刻及其蛋白量也有必定影响,一般多采用4℃ 18～24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定：即用不一样的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后，在其它试验条件相一起，调查阳性标本的OD值。挑选OD值zui大而蛋白量起码的浓度。关于大都蛋白质来说一般为1～10μg/ml。
(3) 酶符号抗体作业浓度的挑选：首先用直接ELISA法进行开始效价的滴定(见酶符号抗体部份)。然后再固定其它条件或采纳“方阵法”(包被物、待检样品的参阅品及酶符号抗体分别为不一样的稀释度)在正式试验体系里准确地滴定其作业浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的挑选：ELISA试剂盒对供氢体的挑选请求是价廉、安全、有明显地显色反响，而自身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌效果，应留意防护。有条件者应运用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是现在较为满足的供氢体。底物效果一段时刻后，应参加强酸或强碱以终止反响。一般底物效果时刻，以10-30分钟为宜。底物运用液有必要新鲜制造，尤其是H2O2在临用前参加。- 上一篇：影响ELISA试剂盒检测因素的五个方面
- 下一篇：固体在ELISA试剂盒样本处理方法
产品中心
Products