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牛泰勒虫抗体(Theileria)ELISA试剂盒
产品时间:2016-08-15
牛泰勒虫抗体(Theileria)ELISA试剂盒
英文名称:Cattle Theileria antibody ELISA kit
产品规格:96T/48T

牛泰勒虫抗体(TheileriaELISA试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
使用目的:本试剂盒用于测定牛血清、血浆及相关液体样本中泰勒虫病(theileriasis)的表达。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛泰勒虫病(theileriasis)表达。用纯化的牛泰勒虫病

(theileriasis)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中泰勒虫病(theileriasis)相结合,经

洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的泰勒虫病(theileriasis)抗体结合,形成

抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下

转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD

值),与 CUTOFF 值相比较,从而判定标本中牛泰勒虫病(theileriasis)的存在与否。

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能

马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 孔、阳性对照 孔、空白对照 1

孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)

2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先

加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不

触及孔壁,轻轻晃动混匀,

3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此

重复 次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。

7.温育:操作同 3

8.洗涤:操作同 5

9.显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

15 分钟.

10. 终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止

液后 15 分钟以内进行。

计算和结果判定:

试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10

临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15

阴性判定:样品 OD 临界值(CUT OFF)者为泰勒虫病(theileriasis)阴性

阳性判定:样品 OD 值≥ 临界值(CUT OFF)者为泰勒虫病(theileriasis)阳性

牛泰勒虫抗体(TheileriaELISA试剂盒
英文名称:Cattle Theileria antibody ELISA kit

产品规格:96T/48T
注意事项

1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。

2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未

用完,板条应装入密封袋中保存。

3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5.底物请避光保存。

6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为 630nm

7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸,使用时必须

注意安全。

牛泰勒虫抗体(TheileriaELISA试剂盒保存条件及有效期

1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:个月

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