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下面是我司为大家讲述一些鸭碘甲腺原氨酸脱碘酶I型原理ELISAkitELISA实验中的小技巧,希望对大家有所帮助!
1. 操作前应对实验的物理参数有充分的了解,如环境温度(保持在18C~25℃)、反应孵育温度和孵育时间、洗涤的次数等,要先查看水育箱温度,ELISA试剂盒是否符合要求。
2. 正确使用加样器加样器应垂直加入标本或试剂,避免刮擦包被板底部。
3. 加样过程中避免液体外溅,血清残留在反应孔壁上,加样器吸头要清洗干净,避免污染,加样次序要与说明书一致,否则可导致结果错误,实验重复性差。
4. 手工洗板加洗液时冲击力不要太大,洗涤次数不要超过说明书推荐的洗涤次数,洗液在反应孔内滞留的时间不宜太长。不要使洗液在孔间窜流,造成孔问污染,导致假阴性或假阳性。
5. 要保证加液量一致ELISA试剂盒我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好,滴瓶不易控制加液量不准,造成显色不统一,判断错误。
6. 显色液量不可过多加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下,加显色系统后要避光反应,显色液量不能过多,以免显色过强。
鸭碘甲腺原氨酸脱碘酶I型原理ELISAkit间接法测抗体步骤:
间接法是检测抗体常用的方法,其原理为利用酶标记的抗抗体(二抗)以检测与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法,操作步骤如下:
1)将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原,洗涤除去未结合的抗原及杂质。
2)加稀释的样本,保温反应,样本中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物,
3)经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体,样本中的其他成份在洗涤过程中被洗去。
4)加酶标抗抗体,固相免疫复合物中的抗体与酶标抗抗体结合,从而间接地标记上酶,洗涤后,固相载体上的酶量与样本中受检抗体的量正相关。
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