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    研域讲解之细胞的传代

    发布时间: 2020-03-09  点击次数: 203次

    1. 贴壁细胞:

     

    对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱.50ml培养瓶加入消化液约0.6ml,按此比例进行消化,(根据配制强度经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml完全培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入完全培养基后继续培养或实验.

     

    2. 悬浮细胞:

     

    一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入完全培养基继续培养,如要高浓度可先离500rpm,5mi后加入完全培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养.

     

    细胞传代培养注意事项:

     

    1. 严格的无菌操作

     

    2. 适度消化:消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化 。   
       
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