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    研域课堂:培育基怎么消除组织培育的污染?

    发布时间: 2020-03-04  点击次数: 198次

    当重要的培育污染时,研究者或许企图消除或控制污染。首要,确认污染物是细菌、真菌、支原体或酵母,把污染细胞与其它细胞系隔离开,用试验室消du剂消du培育器皿和超净台,检查HEPA过滤器。高浓度的抗生素和抗霉菌素或许对一些细胞系有du性,因而,做剂量反响试验确认抗生素和抗霉菌素发生du性的剂量水平。下面是推荐的确认du性水平缓消除培育污染的试验过程。

    ① 在无抗生素的培育基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。

    ② 分散细胞悬液到多孔培育板中,或几个小培育瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗生素加入到每一个孔中。

    ③ 每天观测细胞du性目标,如脱落,呈现空泡,汇合度下降和变圆。

    ④ 确认抗生素du性水平后,运用低于du性浓度2-3倍浓度的抗生素的培育液培育细胞2-3代。

    ⑤ 在无抗生素的培育基中培育细胞一代。

    ⑥ 重复过程4。

    ⑦ 在无抗生素的培育基中培育4-6代,确认污染是否以已被消除。
     
    培育基操作建议:

    1、商品化的应根据运用说明书上的要求进行贮存。标签上应标有批号,生产日期、有效期及有关特性。所选用的保藏和运送条件应使限度失掉水分并提供机械维护。

    2、配制好之后应保存在2~25℃避光的环境。若保存于非密闭容器中,一般在三周内运用;若保存于密闭容器中,一般在一年内运用,琼脂培育基不得在0℃或0℃以下存放,防止冷冻破坏凝胶特性。若要长期保存,琼脂平板应密闭包装或置于密闭容器中以防止水分丢失。

    3、保存于密闭容器中,可防止水分丢失以延长保存时刻。

    4、灭菌后应立即取出,不得储藏在高压菌器中,避免影响质量。制备好之后应保存在2~25℃、避光的环境。

    5、固体培育基灭菌后的再融化应在加热的水浴中或选用流通蒸汽进行,只允许一次,融化后应放在45~50℃的水浴中,不得超越8小时。

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