研域课堂：培育基怎么消除组织培育的污染？

当重要的培育污染时，研究者或许企图消除或控制污染。首要，确认污染物是细菌、真菌、支原体或酵母，把污染细胞与其它细胞系隔离开，用试验室消du剂消du培育器皿和超净台，检查HEPA过滤器。高浓度的抗生素和抗霉菌素或许对一些细胞系有du性，因而，做剂量反响试验确认抗生素和抗霉菌素发生du性的剂量水平。下面是推荐的确认du性水平缓消除培育污染的试验过程。

① 在无抗生素的培育基中消化、计数和稀释细胞，稀释到常规细胞传代的浓度。

② 分散细胞悬液到多孔培育板中，或几个小培育瓶中。在一个浓度梯度范围内，把选择抗生素加入到每一个孔中。
​
③ 每天观测细胞du性目标，如脱落，呈现空泡，汇合度下降和变圆。

④ 确认抗生素du性水平后，运用低于du性浓度2－3倍浓度的抗生素的培育液培育细胞2－3代。

⑤ 在无抗生素的培育基中培育细胞一代。

⑥ 重复过程4。

⑦ 在无抗生素的培育基中培育4－6代，确认污染是否以已被消除。
 
培育基操作建议：

1、商品化的应根据运用说明书上的要求进行贮存。标签上应标有批号，生产日期、有效期及有关特性。所选用的保藏和运送条件应使限度失掉水分并提供机械维护。

2、配制好之后应保存在2～25℃避光的环境。若保存于非密闭容器中，一般在三周内运用；若保存于密闭容器中，一般在一年内运用，琼脂培育基不得在0℃或0℃以下存放，防止冷冻破坏凝胶特性。若要长期保存，琼脂平板应密闭包装或置于密闭容器中以防止水分丢失。

3、保存于密闭容器中，可防止水分丢失以延长保存时刻。

4、灭菌后应立即取出，不得储藏在高压菌器中，避免影响质量。制备好之后应保存在2～25℃、避光的环境。

5、固体培育基灭菌后的再融化应在加热的水浴中或选用流通蒸汽进行，只允许一次，融化后应放在45～50℃的水浴中，不得超越8小时。