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    合适ELISA试剂盒检测样本的办法

    发布时间: 2017-11-16  点击次数: 369次

    血清是zui常用的ELISA试剂盒标本之一,ELISA检测中血浆一般可视为与血清平等的标本,标本中烦扰性物质是引起检测后作用偏高或偏低的主要原因,烦扰性物质分为内源性物质和外源性物质两大类;
    外源性物质常常是由于用于ELISA测定的血标本的搜集、贮存等不当所构成的。如标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存过久、标本凝集 不全和采血管中添加物等影响。
    由于各种人为原因引起的标本溶血,均可因红细胞损坏溶解时释放出许多具有过氧化物酶活性的血红蛋白,在以辣根过氧化物酶为符号的 ELISA测定中,会导致非特异性显色,烦扰测定作用。
    标本受细菌污染 :因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶,因此,被细菌污染的标本同溶血标本一样,亦可发生非特异性显色而烦扰测定作用。
    ELISA试剂盒标本保存不当 :在冰箱中保存过久的标本,血清中IgG可聚组成多聚体、AFP可构成二聚体,在间接法ELISA测定中会导致本底过深、甚至构成检测OD值偏高;
    标本凝集不全;在ELISA检测中影响血清血浆样本的要素许多,在考虑试剂要素和操作要素之外,也应从标本要素方面进行分析。
    常见的烦扰物质有:类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig (s)抗体、穿插反应物质和其它物质等。
    类风湿因子 :血清中IgM、IgG型类风湿因子(RF)在ELISA检测中,可与ELISA系统中的捕获抗体及酶符号二抗的FC段直接结合,然后导致检测OD值偏高。
    补体 : ELISA系统中固相一抗和符号二抗过程中,抗体分子发生变构,其FC段的补体C1q分子结合位点被露出出来,使C1q 可以将二者连接起来,然后构成检测OD值偏高。
    嗜异性抗体;人类血清中含有能与啮齿类动物(如鼠等)Ig (s) 结合的天然嗜异性抗体,可将ELISA系统中一抗和二抗连接起来,也能构成检测OD值偏高。
    ELISA试剂盒此外血清中嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig (s)抗体、穿插反应物质及血清中脂质过高、胆红素、血红蛋白及血液粘度过大等,均对ELISA测定作用有烦扰作用。

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