PCR在临床中的应用（三）

 对于梅毒（TP）的诊断：敏感性、特异性均高。一般用来做确证试验。不能用于观察疗效：即使患者经过足够的抗梅治疗，血清学反应仍可保持阳性，甚至保持终生。

  目的探讨聚合酶链反应（PCR）反向膜杂交技术检测临床标本中结核分支杆菌（TB）DNA的价值.方法用PCR反向膜杂交技术检测522例结核及60例非结核患者临床标本中的TBDNA,同时用培养、抗酸染色涂片及常规PCR法作对照.结果PCR反向膜杂交法阳性率为80.6%（411/690）,培养为18.1%（125/690）,镜检为13.9%（96/690）,常规PCR为59.6%（411/690）,PCR反向膜杂交法与常规法比较（P＜0.001＝,差异有显著意义.PCR反向膜杂交法阳性检出率高于常规PCR（P＞0.05）,但差异无显著意义;该技术假阳性为零.结论PCR反向膜杂交技术检测临床标本中TB-DNA具有快速、高度特异性和敏感性,可为结核病的临床早期诊断提供一种新的病原学诊断手段.

   近年来聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）技术已经用于Hp的诊断，该技术的敏感性比寡核苷酸探针增加了100倍，可以检出少至100个Hp。目前Hp的尿素酶基因和16SrRNA基因的部分序列已经测出，为PCR特异性引物的选择提供了依据。我们以一对与16SrRNA基因互补的寡核苷酸为引物（CP1/CP2），建立了从胃粘膜活组织标本中检测Hp感染的PCR技术。用该方法检测Hp标准菌株NCTC 11637，NCTC11848及50株从临床病人胃粘膜活组织中分离的Hp菌株均产生450bp的片段，其敏感性为0.1pg的HpDNA，相当于100个细菌细胞 ，而对12株非Hp菌株（包括金葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎双球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、痢疾杆菌及空肠弯曲菌NCTC11351）以及无Hp感染的人胃粘膜细胞呈阴性反应。我们还用PCR检测了96例因上消化道症状而行胃镜检查的患者，结果表明PCR检查的Hp阳性率高于常规检查法。我们还对17例经不同方案治疗后用常规方法检查（尿素酶试验、银染、及培养均阴性）而被认为Hp被*的病人，用PCR检查发现4例Hp阳性。以往我们对一些常规方法未能检出而实际上还存在Hp的病人，误认为Hp被*而放弃治疗，这些病人短期内Hp再现实际上是治疗不*，这对于指导Hp感染的治疗有十分重要的临床意义。
 
   HCMV感染是器官移植受者术后常见并发症之一。HCMV感染系全身感染，临床表现多样，与移植排斥反应的临床症状十分相似，易于混淆，但二者的产生条件截然相反，在治疗上*不同。要弄清器官移植术后受者的临床症状是否由HCMV感染所致，及时诊断活动性HCMV感染非常重要。HCMV感染是影响器官或组织移植成败的重要因素。特别在骨髓移植感染中，如不及时诊治，常可引起致命危险和移植失败。因此早期诊断和及时有效的预防性治疗是降低移植术后HCMV病发生率和死亡率的关键。荧光定量PCR技术对HCMV DNA的检测对感染的检测具有临床应用价值，因为体液中病毒DNA先于病毒感染的临床症状或血清学证据的出现，可作为HCMV感染的早期指标，对于HCMV感染疾病的治疗和预防具有重要的意义。由于HCMV可通过胎盘内感染、产道感染等途径传播，而且受感染的新生儿死亡率较高，因此利用PCR进行早期诊断及采取及时的治疗措施，对优生优育也有重要意义。目前对HCMV感染疾病的治疗和预防主要采用抗病毒药物。显然对抗病毒药物的疗效需要有有效的观察和评价手段。荧光定量PCR对HCMV DNA可进行定量分析，检测指标稳定，通过对DNA血症水平的动态观察以监测HCMV疾病的发生、发展及预后，及时调整免疫抑制剂的用量，指导抗病毒治疗，观察疗效，分析是否有耐药等，因此可作为评价各种抗病毒药物疗效的有力手段。




附录：
PCR在临床中的应用（二）
PCR在临床中的运用（一）